2021年2月18日,Plant Biotechnology Journal(影響因子8.15)在線發(fā)表了以四川農(nóng)業(yè)大學水稻研究所王愛軍博士為作者,碩士生舒新月為共同作者,鄭愛萍教授和李平教授為通訊作者題為“Identification of rice (Oryza sativaL.) genes involved in sheath blight resistance via a genome-wide association study”的研究論文。 水稻紋枯?。⊿heath blight disease)是水稻生產(chǎn)中的三大主要病害之一,對水稻產(chǎn)量造成嚴重的損失。隨著我國水稻高分蘗、半矮稈、耐肥、高產(chǎn)品種的推廣以及機械化直播栽培技術的應用,近年來水稻紋枯病的發(fā)生呈現(xiàn)上升趨勢,目前已經(jīng)發(fā)展成為我國分布和危害廣的病害之一。由于水稻抗性資源的及缺乏系統(tǒng)鑒定和挖掘,紋枯病抗性分子育種研究方面處于停滯不前的狀態(tài),挖掘水稻紋枯病抗性基因并解析其內(nèi)在的抗性分子機制對提高水稻品種紋枯病抗性,減輕病害損失具有重要的意義。 該研究通過多年多點對搜集整理的259個水稻品種(含高抗紋枯病的地方品種資源)進行苗期、分蘗期、穗期紋枯病關鍵發(fā)生時期的全基因組關聯(lián)分析(Genome-wide association study, GWAS),結(jié)合不同時空侵染的抗感材料轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)及抗性QTL位點分析,鑒定獲得653個與水稻紋枯病抗性顯著關聯(lián)的基因。其中,抗性相關基因OsRSR1和OsRLCK5,通過超表達、RNAi干涉分析發(fā)現(xiàn),超表達OsRSR1和OsRLCK5可顯著提高水稻對紋枯病的抗性,干涉OsRSR1和OsRLCK5可大幅度降低水稻對紋枯病的抗性。 OsRSR1含有NBS-LRR結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)相互作用實驗結(jié)果表明,其CC結(jié)構(gòu)域通過與水稻絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶OsSHM1互作而影響活性氧(Reactive oxygen species, ROS)水平。qRT-PCR結(jié)果顯示,超表達OsRSR1轉(zhuǎn)基因株系中多個ROS相關基因的mRNA水平顯著增加,同時酶活性檢測表明多個抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)系統(tǒng)(Glutathione-ascorbic acid antioxidant system)相關酶活性顯著增加,酶構(gòu)成了能有效病原菌侵染產(chǎn)生自由基的循環(huán)系統(tǒng)。胞質(zhì)類受體激酶基因OsRLCK5可通過與水稻谷氧還蛋白GRX20互作而參與抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)系統(tǒng),在維持蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性,生物膜系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的完整性及防御膜膜脂過氧化起重要作用,進而提高水稻對高水平ROS的抵抗能力。 綜上,該研究結(jié)果表明,水稻紋枯病抗性基因OsRSR1和OsRLCK5可通過抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)系統(tǒng)調(diào)節(jié)ROS平衡以增強水稻對紋枯病的抗性,該發(fā)現(xiàn)可為水稻紋枯病抗性分子育種提供新思路。 該研究受到國家973前期專項(2014CB160304),國家自然基金項目(31400130,31971867),四川省科技廳重點研發(fā)項目(2019YFN0010)的資助。前期關于水稻紋枯病菌病原機制及與水稻互作的研究結(jié)果已發(fā)表在Nature Communications等雜志上。
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